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激光共聚焦顯微鏡的原理

作者:上海豫光 來源:未知 日期: 2012-05-07 16:25:32
導讀:傳統(tǒng)的光學顯微鏡使用的是場光源,標本上每一點的圖像都會受到鄰近點的衍射或散射光的干擾;激光掃描共焦顯微鏡采用點光源照射樣本,在焦平面上形成一個輪廓分明…
       傳統(tǒng)的光學顯微鏡使用的是場光源,標本上每一點的圖像都會受到鄰近點的衍射或散射光的干擾;激光掃描共焦顯微鏡采用點光源照射樣本,在焦平面上形成一個輪廓分明的小的光點,該點被照射后發(fā)出的熒光被物鏡搜集,并沿原照射光路回送到由雙色鏡構(gòu)成的分光器。分光器將熒光直接送到探測器。光源和探測器前方都各有一個針孔,分別稱為照明針孔和探測針孔。照明針孔與探測針孔相對于物鏡焦平面是共軛的,焦平面上的點同時聚焦于照明針孔和發(fā)射針孔,焦平面以外的點被擋在探測針孔之外不能成像,這樣得到的共聚焦圖像是標本的光學切面,避免了非焦平面上雜散光線的干擾,克服了普通顯微鏡圖像模糊的缺點,因此能得到整個焦平面上清晰的共聚焦圖像。
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